《植物生理学报》 2005, 41(4): 433-438

柽柳翻译起始因子(eIF-5A)基因的克隆及原核表达

杨传平 姜静 田梗 王玉成* 刘桂丰

东北林业大学林学院，哈尔滨 150040

通信作者：王玉成；E-mail: wangyucheng1029@yahoo.com.cn；Tel: 0451-82191627

摘　要：

根据柽柳 cDNA 文库中获得的 eIF-5A 基因片段，用 RACE 技术克隆出其全长 cDNA 序列。cDNA 长度为 799 bp， 编码 159 个氨基酸。将该 cDNA 序列克隆到原核表达载体 pET28a 中，获得重组质粒 pET28a-eIF5A。不同浓度 NaCl 胁迫 下大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (pET28a-eIF5A)比 E. coli BL21 (pET28a)有明显的抗盐性，前者菌株存活率在 1.0 mol•L-1 NaCl 盐胁迫下是后者的 9.3 倍，据此认为 E. coli BL21 (pET28a-eIF5A)的耐盐性可能与 eIF-5A 基因的表达相关。该基因 的 GenBank 登录号为 AY587771 (基因)、AAT01416 (蛋白)。

关键词：柽柳；RACE；eIF-5A；原核表达；耐盐

收稿：2004-11-17   修定：2005-03-15

资助：国家重点基础研究发展规划(“973”)项目(G1999016000) 和国家转基因植物研究与产业化专项(JY03A1802)

柽柳翻译起始因子(eIF-5A)基因的克隆及原核表达

杨传平 姜静 田梗 王玉成* 刘桂丰

东北林业大学林学院，哈尔滨 150040

Corresponding author: ; E-mail: wangyucheng1029@yahoo.com.cn; Tel: 0451-82191627

Abstract:

根据柽柳 cDNA 文库中获得的 eIF-5A 基因片段，用 RACE 技术克隆出其全长 cDNA 序列。cDNA 长度为 799 bp， 编码 159 个氨基酸。将该 cDNA 序列克隆到原核表达载体 pET28a 中，获得重组质粒 pET28a-eIF5A。不同浓度 NaCl 胁迫 下大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (pET28a-eIF5A)比 E. coli BL21 (pET28a)有明显的抗盐性，前者菌株存活率在 1.0 mol•L-1 NaCl 盐胁迫下是后者的 9.3 倍，据此认为 E. coli BL21 (pET28a-eIF5A)的耐盐性可能与 eIF-5A 基因的表达相关。该基因 的 GenBank 登录号为 AY587771 (基因)、AAT01416 (蛋白)。

Key words: 柽柳；RACE；eIF-5A；原核表达；耐盐